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KREATININKINETISCH-KOLORIMETRISCHE METHODE
(JAFFE’-PROBE OHNE DEPROTEINISIERUNG) Verpackung
REF.-NR. 2053 6 x100 ml
REF.-NR. 2051 2 x250 ml Reaktionsprinzip
In einer basischen Lösung bildet KREATININ mit Pikrinsäure einen farbigen Komplex. Dabei ist die Zunahmerate der Absorption direkt proportional zur Kreatinin-Konzentration im Serum.
Die kinetische Versuchsdurchführung reduziert die Effekte interferierender Substanzen.
Inhalte und Zusammensetzung der Reagenzien und Sicherheitshinweise
- Reagenz 1 (REF.-NR. 2053 3 x 100 ml/REF.-NR. 2051 1 x 250 ml)Pikrinsäure 72 mmol/l
- Reagenz 2 (REF.-NR. 2053 3 x 100 ml/REF.-NR. 2051 1 x 250 ml)Natriumhydroxid 600 mmol/l
Borat-Puffer 31 mmol/l
- Kalibrator 1 x 10 ml
Kreatinin 2 mg/dl
Reagenz 2 ist klassifiziert als C = ätzend
Inhalt: NATRIUMHYDROXID
Risiko
| • R34 | Verursacht Verbrennungen. | | • S26 | Spülen Sie bei Kontakt der Substanz mit den Augen diese umgehend mit reichlich Wasser und suchen Sie einen Arzt auf. | | • S45 | Suchen Sie im Fall eines Unfalls oder bei Auftreten von Unwohlsein umgehend einen Arzt auf. (Zeigen Sie, falls möglich, das Etikett vor.) | | • S61 | Vermeiden Sie eine Freisetzung dieser Substanz. Siehe die speziellen Anweisungen/Sicherheitsdatenblätter. | | • S36/37/38 | Tragen Sie angemessene persönliche Schutzkleidung, Handschuhe sowie eine Schutzbrille/einen Gesichtschutz. |
Lagerung und Stabilität der Reagenzien
Lagern Sie die Reagenzien bei Raumtemperatur. Lagern Sie den Kalibrator bei 2-8°C
Sämtliche Komponenten sind bis zum Erreichen des angegebenen Verfalls-datums stabil. Voraussetzung ist eine Lagerung unter Luftausschluss. Präparation und Stabilität der Arbeitslösungen
Reagenzien flüssig und gebrauchsfertig
Mischen Sie 1 Anteil von Reagenz 1 mit 1 Anteil von Reagenz 2
Stabilität der Arbeitslösung: 7 Tage bei 2-8°C.
Erwärmen Sie die Reagenzien vor Gebrauch auf Raumtemperatur. Probe
Frisch-Serum ohne Hämolyse
Urin verdünnt mit destilliertem Wasser im Verhältnis 1:20 Sicherheitsmassnahmen
Ausschließlich zum Gebrauch in der In vitro-Diagnostik.
Es ist untersagt, mit dem Mund zu pipettieren.
Befolgen Sie die normalen Vorsichtsmassnahmen, die beim Umgang mit im Labor verwendeten Reagenzien erforderlich sind.
Testablauf
| Wellenlänge | Hg 510 nm (500-520) | | Küvette | Lichtweg: 1cm | | Temperatur | 30/37°C |
Führen Sie einen Nullabgleich des Geräts gegen Luft oder destilliertes Wasser durch. Pipettieren Sie in Küvetten | Makro-Methode | Semimikro-Methode | | Probe | Kalibrator | Probe | Kalibrator | | Probe | 200μl | - | 100μl | - | | Kalibrator | - | 200μl | - | 100μl | | Arbeitslösung | 2ml | 2ml | 1ml | 1ml |
Mischen Sie die Ansätze und transferieren Sie sie in die entsprechenden Küvetten. Stellen Sie das Thermostat auf 30 oder 37°C ein. Warten Sie 30 Sekunden und messen Sie die erste Absorption (A1) von Kalibrator und Proben bei einer Wellenlänge von 510 nm.
Bestimmen Sie nach 2 Minuten die zweiten Absorptionswerte (A2) und berechnen Sie die Differenz ∆A = (A2-A1).
Berechnung Serum
ΔA Probe
KREATININ (mg/dl) = ------------------------x Kalibrator-Wert
ΔA Kalibrator Urin
ΔA Probe
KREATININ (mg/dl) = -------------------- x Kalibrator-Wert x 20
ΔA Kalibrator Urin/24h
Kreatinin in Urin (mg/dl)
KREATININ (g/24h) = ------------------------------------- x Urin-Volumen 24 h (lt)
100 Clearance
Kreatinin in Urin (mg/dl) x Urin-Volumen 24 h (ml) 1.73
CLEARANCE (ml/min) = -------------------------------------------------------------------------- x ---------- Kreatinin in Serum (mg/dl) x 1440 S S = Körperoberfläche in m2 Referenzwerte | Serum (mg/dl) | Urin (g/24 h) | Clearance (ml/min) | Männlich | 0.8-1.4 | 1-2 | 97-135 | Weiblich | 0.7-1.2 | 0.8-1.8 | 88-128 | Kinder <2 Jahre | 0.3-0.6 | | |
Diese Werte dienen ausschließlich als Richtlinien.
Jedes Labor sollte einen eigenen normalen Referenzbereich etablieren. Performanzeigenschaften A. LINEARITÄTS-GRENZE
Die Reaktion verläuft bis 25 mg/dl linear.
Verdünnen Sie für höhere Werte die Probe mit destilliertem Wasser im Verhältnis 1:2. Wiederholen Sie den Test und multiplizieren Sie das Ergebnis mit 2. B. DETEKTIONS-GRENZE
Für Werte von weniger als 0.15 mg/dl werden nicht reproduzierbare Ergebnisse erhalten.
C. INTRA-ASSAY-PRÄZISION (N = 20 Wiederholungen) Mittelwert (mg/dl) SD CV%
Kontrolle 1 1.3385 0.036 2.72
Kontrolle 2 3.7180 0.108 2.92 D. INTER-ASSAY-PRÄZISION (20 Wiederholungen an 3 Tagen) Mittelwert SD CV%
Kontrolle 1 1.34 0.05 3.47
Kontrolle 2 3.71 0.05 1.39 E. GENAUIGKEIT
Ein Vergleich der hier beschriebenen Methode (y) mit einer anderen kommerziellen Methode (x)
ergab die nachfolgend dargestellten Ergebnisse: N = 20 r = 0.990417 y = 0.96x + 0.024 F. INTERFERENZEN Hämoglobin bis zu einer Konzentration von 150 mg/dl führt zu keiner Beeinträchtigung.
Bilirubin bis zu einer Konzentration von 15 mg/dl führt zu keiner Beeinträchtigung.
Triglyceride bis zu einer Konzentration von 1500 mg/dl führen zu keiner Beeinträchtigung. Qualitätskontrolle Es wird empfohlen, die Performanz der manuellen und automatisierten Durchführung des Assays unter Verwendung von Kontroll-Seren zu kontrollieren. Von BGT sind folgende Kontroll-Seren erhältlich: Chemie-Kontrolle N KG 1530
Chemie-Kontrolle P KG 1532 Hinweis
Verwenden Sie für die automatisierte Methode anstelle des Kit-eigenen Kalibrators:
Multikalibrator KG 2350 und 2351 Literatur Henry, R.J.: Clinical Chemistry: Principles and Techniques, Harper & Row.N.Y., 287 (1964). Young et al.: Clinical Chemistry, 18 (1972).
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