Produkte/Klinische Chemie/Reagenzien/Liqui CK NAK
LIQUI CK NACKINETISCHE UV-METHODE
(IFCC - DGKC) Verpackung
REF.-NR. 7066 5 x 10 ml
REF.-NR. 7006 5 x 50 ml Reaktionsprinzip
Kinetische Bestimmung von CK in Übereinstimmung mit den Empfehlungen der IFCC und DGKC:
CK
Kreatinphosphat + ADP ------------> Kreatin + ATP HK
ATP + D-Glucose -----------> D-Glucose-6-phosphat + ADP G-6-PDH
D-Glucose-6-phosphat + NADP+ -----------------> D-Gluconat-6-phosphat + NADPH+ + H+ Die Geschwindigkeit der Bildung von NADPH wird bei 340 nm photometrisch bestimmt. Diese ist direkt proportional zur Aktivität der CK. Hinweis:
Die Aktivierung aller Fraktionen der CK beruht entsprechend den Empfehlungen der IFCC und DGKC auf N-Acetyl-L-Cystein (NAC). Zusammensetzung und Inhalt der Reagenzien und Sicherheitshinweise 1.
Puffer
(Ref.-Nr. 7066 5 x 8 ml/Ref.-Nr. 7006 5 x 40 ml)
Imidazol-Puffer (pH 6.3) 110 mmol/l
N-Acetyl-L-Cystein (NAC) 23 mmol/l
Magnesiumacetat 11 mmol/l
EDTA 2.2 mmol/l
NADP 2.2 mmol/l
Exokinase ³3300 U/l
AMP 5.5 mmol/l
Diadenosin-Pentaphosphat 0.025 mmol/l
D-Glucose 20 mmol/l
Natriumazid <0.1% 2. Substrat (Ref.-Nr. 7066 1 x 10 ml/Ref.-Nr. 7006 1 x 50 ml)
Kreatinphosphat 0.19 mol/l
ADP 11.7 mmol/l
G-6-PDH ³ 10000 U/l
EDTA 2.2 mmol/l
Natriumazid <0,1% In Übereinstimmung mit den vorliegenden Gesetzen enthält das Kit keine als gefährlich klassifizierten Substanzen. Lagerung und Stabilität der Reagenzien
Lagern Sie das Kit bei 2-8°C. Vermeiden Sie direkte Sonneneinstrahlung.
Sämtliche Komponenten sind bis zum Erreichen des angegebenen Verfallsdatums stabil. Voraussetzung ist eine gekühlte und lichtgeschützte Lagerung unter Luftausschluss. Präparation und Stabilität der Arbeitslösungen Reagenzien flüssig und gebrauchsfertig - TESTDURCHFÜHRUNG FÜR EIN REAGENZ
Mischen Sie 4 Anteile Puffer mit 1 Anteil Substrat
Stabilität der Arbeitslösung: 10 Tage bei 2-8°C.
- TESTDURCHFÜHRUNG FÜR ZWEI REAGENZIEN
Siehe oben.
Erwärmen Sie die Reagenzien vor dem Gebrauch auf Raumtemperatur. Probe
Frisch-Serum, heparinisiertes oder EDTA-Plasma. Sicherheitsmasnahmen
Ausschließlich zum Gebrauch in der In vitro-Diagnostik.
Es ist untersagt, mit dem Mund zu pipettieren.
Befolgen Sie die normalen Vorsichtsmassnahmen, die beim Umgang mit im Labor verwendeten Reagenzien erforderlich sind. Testablauf - Wellenlänge 340 nm
- Küvette Lichtweg: 1 cm
- Temperatur 25/30/37°C.
- Führen Sie einen Nullabgleich des Geräts gegen destilliertes Wasser durch.
DURCHFÜHRUNG FÜR EIN REAGENZ | DURCHFÜHRUNG FÜR ZWEI REAGENZIEN | Probe | 20 ml | Puffer | 0.8 ml | Arbeitslösung | 1 ml | Probe | 20 µl | Substrat | 200 µl |
Mischen Sie die Ansätze. Warten Sie nach dem Mischen der Ansätze 3 Minuten und bestimmen Sie dann die Absorption. Starten Sie gleichzeitig eine Stoppuhr. Bestimmen Sie die Absorption nach 1, 2 und 3 Minuten erneut.
Berechnen Sie den Mittelwert der Absorptions-Differenz pro Minute (ΔA/min). Berechnung
CK (U/I) = DA/min x 8095 Referenzwerte | 25°C | 30°C | 37°C | Männlich | 10-80 U/l | 15-130 U/l | 24-195 U/l | Weiblich | 10-70 U/l | 15-110 U/l | 24-170 U/l |
Diese Werte dienen ausschließlich als Richtlinien.
Jedes Labor sollte einen eigenen normalen Referenzbereich etablieren. Peformanzeigenschaften A. LINEARITÄTS-GRENZE
Die Reaktion verläuft bis 1500 U/I linear.
Verdünnen Sie für höhere Werte die Probe mit normaler Saline in einem Verhältnis von 1:2. Wiederholen Sie den Test und multiplizieren Sie den Wert mit 2. B. DETEKTIONS-GRENZE
Für Werte von weniger als 4 U/I werden nicht reproduzierbare Ergebnisse erhalten. C. INTRA-ASSAY-PRÄZISION (N = 20 Wiederholungen) Mittelwert (U/l) SD CV%
Kontrolle 1 166.25 3.389 2.04
Kontrolle 2 425.30 4.428 1.04 D. INTER-ASSAY-PRÄZISION (20 Wiederholungen an 3 Tagen) Mittelwert (U/l) SD CV%
Kontrolle 1 161.20 4.12 2.56
Kontrolle 2 420.07 7.19 1.71 E. GENAUIGKEIT
Ein Vergleich der hier beschriebenen Methode (y) mit einer anderen kommerziellen Methode (x)
ergab die nachfolgend dargestellten Ergebnisse: N = 20 r = 0.9999177 y = 1.01x - 6.73 F. INTERFERENZEN Hämoglobin bis zu einer Konzentration von 50 mg/dl führt zu keiner Beeinträchtigung. Bilirubin bis zu einer Konzentration von 30 mg/dl führt zu keiner Beeinträchtigung. Triglyceride bis zu einer Konzentration von 1000 mg/dl führen zu keiner Beeinträchtigung. Ascorbinsäure bis zu einer Konzentration von 25 mg/dl führt zu keiner Beeinträchtigung.
Qualitätskontrolle
Es wird empfohlen, die Performanz der manuellen und automatisierten Durchführung des Assays unter Verwendung von Kontroll-Seren zu kontrollieren. Von BGT sind folgende Kontroll-Seren erhältlich:
Chemie-Kontrolle N REF.-Nr. 4010
Chemie-Kontrolle P REF.-Nr. 5010 Hinweis
Verwenden Sie für die automatisierte Methode den multiparametrischen Kalibrator:
Multikalibrator Ref.-Nr. 6002 Literatur - Mathieu M.et coll.: Recommendation pour la measure de la concentration catalytique de la Créatinine Kinase dans le sérum humain. Ann. Biol. Clin. 40, 87 (1982)
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